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G1021-10ml botella de células necróticas de propidio yoduro PI

ESPECIPCIÓN:10ml
Uso del producto:Tinción nuclear de células necróticas o tejidos.
Almacenamiento y transporte:Almacenado a 4 ° C y protegido de la luz, válida por 6 meses.
ml:
Estado de Disponibilidad:
  • G1021-10ml
  • Servicebio

Descripción del producto


Descripción del producto

Pi, o yoduro de propidio, es un análogo de bromuro de etidio, que puede unirse fuertemente al ADN. Libera la fluorescencia roja después de insertarse en el ADN de doble cadena para lograr la tinción de los núcleos de ADN o celulares. Pi no puede penetrar en la membrana celular intacta, pero puede penetrar en la membrana celular dañada de las células apoptóticas tardías y las células muertas. Aprovechando esta función, la PI se usa generalmente en combinación con sondas fluorescentes, como Calcein-AM o FDA para mancharse y observar las células vivas y muertas. O use citometría de flujo para detectar apoptosis celular y ciclo celular cuantitativamente. La longitud de onda de excitación máxima del complejo de ADN de doble cadena PI es de 535 nm, y la longitud de onda de emisión máxima es de 615 nm.


La solución de tinción PI de este producto está lista para usar, con una concentración de PI de 100 μg / ml, que se puede usar directamente para la tinción nuclear de células o tejidos necróticos, y la suspensión celular se puede manchar con esta solución de tinción Para la detección del ciclo celular por citometría de flujo.


Uso del producto
nombre del producto

Código

Especificidad

Mancha pi

G1021-10ml

10 ml


Uso:

Pasos de operación para la citometría de flujo para detectar el ciclo celular:


1. Las células vivas cultivadas se digieren, se lavan con PBS, y se cobran por centrifugación de baja velocidad para obtener pellets celulares.

2. Agregue lentamente 1-3 ml de etanol al 90% previamente enfriado a -20 ° C a la pellet de células, resuspenda las células en un baño de hielo durante la noche.

3. Centrifugar a 1500 rpm durante 5 minutos para recoger las células, resuspender en PBS y volver a centrifugar para eliminar el sobrenadante.

4. Agregue 250 μl de PBS para resuspender las células.

5. Agregue 2 μl de RNasa A (recomendado WGR8021) a una concentración de 1 mg / ml, y baño de agua a 37 ° C durante 40 min.

6. Agregue 50 μl de solución de tinción PI e incube en la oscuridad durante 20 minutos (el tiempo puede ajustarse de acuerdo con los resultados de la tinción de los materiales experimentales).

7. Detección de citometría de flujo.


Pasos de operación del microscopio de fluorescencia Observación de células vivas y muertas:


1. Después de las células adherentes cultivadas, retire el medio y se lava dos veces con PBS.

2. Diluya la solución de tinción PI 10-20 veces con PBS para preparar una solución de tinción PI con una concentración final de 5-10 μg / ml. Agregue una cantidad adecuada de la solución de trabajo de tinción PI al pozo para cubrir las celdas, y incubar durante 5-10 minutos a temperatura ambiente en la oscuridad.

3. Deseche el trabajo de tinción, agregue PBS para cubrir las celdas y observar con un microscopio de fluorescencia. Los núcleos de las células muertas o las células apoptóticas tardías muestran la fluorescencia roja.



Notas

1. Los tintes fluorescentes tienen el problema de apagar. Se recomienda completar la prueba el mismo día después de la teñida.

2. Por favor, use la capa de laboratorio y los guantes desechables durante la operación.

Empaque y envío

Todos nuestros productos serán embalados en cartón estándar.

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