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G2002-100ml 100 ml Tampón de lisis ripa fuerte para celda

ESPECIPCIÓN:100ml
Uso:Lisis rápida de células y tejidos.
Transporte y almacenamiento:Transporte de bolsa de hielo mojada; Tienda a las 4y mantenerse alejado de la luz, válida por 18 meses.
ml:
Estado de Disponibilidad:
  • G2002-100ml
  • Servicebio

Descripción del producto

Visión general

Ripa Lysis Buffer (Ripa Lyys Buffer) es una solución tradicional rápida de LYSE para celdas y tejidos. Las muestras de proteínas obtenidas de los tejidos y las células se escindan por lisado RIPA se pueden usar para la página de rutina, la inmunoprecipitación (IP), la co-IP y otros experimentos. El líquido de agrietamiento de RIPA tiene muchas formulaciones, según su efecto de agrietamiento se divide principalmente en fuerte, Tres tipos medianos y débiles. Este producto es un fuerte líquido de craqueo de ripa. Sus componentes principales incluyen TRIS-HCl de 50 mm (pH 7,4), NaCl de 150 mm, EDTA-2NA de 1 mM, 1% triton X-100, ácido desoxicólico de sodio y 1% en SDS. Este producto es adecuado para el tejido animal o de plantas. y las muestras de células, también se pueden usar para muestras fúngicas o bacterianas.

Componente

G2002-30ml

G2002-100ml

Tampón de lisis ripa (fuerte)

30 ml

100 ml

Uso del producto


Uso:

Se proporciona inhibidor de la proteasa. El lisado de ripa (fuerte) debe agregarse con inhibidores de la proteasa antes de su uso. G2006, G2007, G2008, etc., se recomiendan para prevenir la degradación de las proteínas. El lisado RIPA (FUERTE) mencionado en el siguiente uso significa que se han agregado los inhibidores de la proteasa.

Para muestras de tejidos:

1. Los bloques de tejido se lavaron con PBS pre-enfriados (recomendado G4202) para eliminar las manchas de sangre, y luego cortar en trozos pequeños y colocarlos en el homogeneizador.

2. Agregue un volumen de tejido de 10x de tampón de lisis de ripa (fuerte) y homogeneizado a baja temperatura (se recomienda utilizar el instrumento de esmerilado de tejido de alta velocidad KZ-III-F y KZ-III-FP, que es desarrollado y producido de forma independiente por ServiceBIO ). Nota: La cantidad de lisado de ripa (sólido) se puede agregar en una proporción de aproximadamente 50 mg de tejido a 1 ml de lisado. Si el contenido de la proteína tisular es baja, la dosis del lisado puede reducirse para aumentar la concentración de proteínas en la solución de extracto de crudo.

3. Transfiera el homogeneizado a un tubo de centrífuga de 1,5 ml y oscilado. Baño de hielo durante 30 minutos, durante el cual la pipeta fue soplada repetidamente para garantizar la lisis completa de las células de tejido;

4. Para las muestras de 12000 g, debe centrifugarse durante 5 min y recoger el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.

Para muestras adherentes:

1. Lave las células con PBS durante 2 a 3 veces, y transmita a fondo el líquido residual por última vez.

2. Vierta el lisado de ripa (fuerte) en la placa de cultivo celular y el matraz de acuerdo con la relación de lisado de células de 250 μl por pocillo de la placa de 6 pocillos, agite la placa de cultivo y el matraz repetidamente, y haga que el lisado esté completamente en contacto con celdas para 3- 5 minutos.

3. Raspe las celdas con una espátula celular y se recolecta en un tubo de centrífuga.

4. Centrifugue a 12000 g durante 5 min y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.

Para la celda de suspensión:

1. Lave las células con PBS durante 2 a 3 veces, y transmita a fondo el líquido residual por última vez.

2. Vierta el lisado de ripa (fuerte) en la placa de cultivo celular y el matraz de acuerdo con la relación de lisado de células de 250 μl por pocillo de la placa de 6 pocillos, agite la placa de cultivo y el matraz repetidamente, y haga que el lisado esté completamente en contacto con celdas para 3- 5 minutos.

3. Raspe las celdas con una espátula celular y se recolecta en un tubo de centrífuga.

4. Centrifugue a 12000 g durante 5 min y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.



Notas:

1. El grosor puede aparecer durante el tejido o la lisis celular. El pipettor puede ser soplado o oscilado repetidamente por el instrumento Vortex hasta que sea líquido. Si ha sido más grueso, puede agregar una cantidad apropiada de líquido de craqueo.

2. Este reactivo no contiene inhibidores de la proteasa. Prepare sus propios inhibidores de la proteasa y agreguelos antes de usarlos. Se recomiendan G2006, G2007, G2008 y otros inhibidores de la proteasa relacionados de nuestra empresa.

3. Por favor, use una capa de laboratorio y guantes desechables durante la operación.

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