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G3411-2000u proteasa de sumo recombinante con ulp1 su etiqueta

Especificación:2000UL
Uso:Retire la proteína etiquetada del sumo de las proteínas de fusión.
Almacenamiento y transporte:Transporte con hielo mojado; tienda en -20, Válido por 12 meses.
u:
Estado de Disponibilidad:
  • G3411-2000U
  • Servicebio

Descripción del producto

Visión general

La proteasa de sumo recombinante (proteasa de modificador relacionada con la ubiquitina pequeña) es una proteasa específica de UBL de UBL (proteasa específica de UBL 1, proteasa específica de la proteína de ubiquitina 1 (ULP1) puede reconocer la estructura terciaria del sumo (similar a una ubiquitina. Modificador) Proteína con alta especificidad. Hidrolizar el enlace peptídico posgly-gly en el péptido X-Gly-Gly-X (excepto Pro) en el terminal carboxi-terminal de la proteína de sumo, de modo que la proteína objetivo liberada después de la escisión de la fusión. La proteína por esta proteasa no contiene exceso de aminoácidos. El pH óptimo y la temperatura para la digestión de la proteasa de sumo fueron de 8.0 y 30. Tiene buena estabilidad y alta actividad enzimática en el rango de pH 6.0-10.0, rango de temperatura 2-30 ℃, fuerza iónica Rango de 0-400 mm Nacl.in Práctica, para preservar la estructura y la actividad biológica de la proteína objetivo en la medida de lo posible, se recomienda utilizar una digestión de proteasa de sumo recombinante a 4 ℃ durante la noche, y al mismo tiempo, agregando apropiado concentración de DTT (0.5-2 mm) en el sistema de digestión puede mejorar significativamente la eficiencia de la digestión.

Aplicación: se usa comúnmente para eliminar la proteína etiquetada del sumo de las proteínas de fusión. La proteasa en sí lleva la etiqueta y se une a la columna de níquel.

Fuente: Saccharomyces Cerevisiae Cysteine ​​protease, expresión recombinante de Escherichia coli, con su etiqueta.

Definición de actividad enzimática: una unidad de actividad enzimática se puede usar para cortar más del 85% de 2 μg de sustrato (que contiene proteína marcada con suma) dentro de 1 h a 30 ℃, PH8.0.

Inactivación o inhibición: imidazol superior a 150 mm afectará la eficiencia de la digestión de la proteasa de sumo recombinante

Pureza y concentración: Pureza de prueba SDS-PAGE ≥95%, 10 U / μL.

Solución de almacenamiento de proteasa sumó recombinante: TRIS-HCl 25 mM, pH 8.0.1% NAP-40,250 mm NaCl, DTT 500 μM, 50% (v / v) glicerol.

10 × tampón de sumo + sal: 500 mm Tris-HCl, pH 8,0,2% NP-40,1.5 m NaCl, 10 mm DTT

10 × Búfer Sumo - Sal: 500 mm Tris-HCl, pH 8,0,2% NP-40,10 mm DTT.


Número de componentes

Componente

G3411-2000U

G3411-1

Protease de sumo recombinante (su etiqueta) (10 u / μl)

200 μl

G3411-2

10 × tampón de sumo + sal

1 ml

G3411-3

10 × Búfer Sumo - Sal

1 ml

G3411-4

Proteína de control

100 μl

Uso del producto


1. Recomendación del sistema de digestiónPortenasa

Componente

Volumen

10 × Búfer Sumo +/- Sal

5 μl

Proteína de interés

20 μg

Protease recombinante TEV (su etiqueta) (10 u / μl)

1 μl

ddh2O

A 50 μl

2. El sistema de reacción se colocó a 4 ℃ por una reacción durante la noche o 16h;

3. Se tomó 10 μl de muestra de producto de digestión para la detección de la página SDS para evaluar la cantidad de digestión y condiciones de reacción.


Notas


1. Los productos enzimáticos deben colocarse en una caja de hielo o baño de hielo antes de su uso. Después del uso, deben almacenarse a -20 ℃ inmediatamente. Se recomienda un almacenamiento separado.

2. Para su seguridad y salud, utilice una capa de laboratorio y guantes desechables para operar.


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