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Hoechst 33342 Reactivo de manchas 1 Solución Mg / ML para la tinción fluorescente del núcleo

Especificación: 1ML
Número CAS: 23491-52-3
Estado de Disponibilidad:
  • G1127-1ml
  • Servicebio
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Descripción del producto

Introducción:

Hoechst 33342 (Bisbenzimide H 33342, HOE 33342) La fórmula molecular es C27H28N6O · 3HCl, el peso molecular es 561.93, y el número CAS es 23491-52-3, que es un tinte fluorescente azul que penetra en la membrana celular al ADN del núcleo. El fluido de tinción es débil en la solución, pero el refuerzo de la fluorescencia se une a la ranura pequeña ADN en la región enriquecida en la secuencia, y por lo tanto se usa para la tinción nuclear, o la tinción con el ADN convencional.

Este producto es una solución, y la concentración HOECHST 33342 es de 1 mg / ml para la tinción, y la concentración de trabajo comúnmente utilizada se recomienda de 0,5 a 10 μg / ml. La longitud de onda de excitación máxima de Hoechst 33342 es 346 Nm, la longitud de onda de emisión máxima es de 460 nm; Después de la unión con el ADN de doble cadena, la longitud de onda de excitación máxima es de 350 nm, la longitud de onda de emisión máxima es de 461 nm. El núcleo se puede usar para una marca de núcleo o núcleo de células fijas o no fijas, y se puede probar mediante microscopio fluorescente o citómetro de flujo, etc.


Almacenamiento y transporte.

Bolso de hielo (hielo húmedo) Transporte; -20 ° C protegido de la luz, 12 meses efectivos.

Pasos

1. Dilute Hoechst 33342 Solución de tinción (1 mg / ml) con PBS u otro tampón adecuado a 0.5-10 μg / ml Hoechst 33342 Solución de trabajo de tinción;

2. Para células fijas o secciones de tejido:

un. Para muestras fijas de células o tejidos, retire el fijador después de la fijación, y lave 2-3 veces con PBS u otro tampón adecuado durante 3-5 minutos cada vez (para detectar células suspendidas, siga el método de operación normal para celdas suspendidas, todos los experimentos necesidad de agregar centrifugación y otros pasos);

B. (Paso opcional) si necesita realizar una tinción de inmunofluorescencia en células o tejidos fijos, priorice los tratamientos relacionados y luego realice la tinción Hoechst 33342 después del tratamiento;

C. Tome una cantidad adecuada de solución de trabajo de tinción Hoechst 33342 para manchar las células o tejidos fijos, cubra la muestra y la incubación a temperatura ambiente durante aproximadamente 5 minutos;

D. Después de eliminar la solución de trabajo Hoechst 33342, lavar 2-3 veces con PBS u otro tampón adecuado, cada vez durante 3-5 min;

mi. Después de montar la diapositiva o observar directamente debajo de un microscopio de fluorescencia, la longitud de onda de excitación es de 350 nm, y la longitud de onda de emisión es de 460 nm.

3. Para células vivas o tejidos cultivados:

un. Agregue una cantidad apropiada de la solución de tinción Hoechst 33342 al cultivo celular, aproximadamente 1/10 del volumen del medio de cultivo celular, que debe cubrir completamente la muestra a mancharse; Por lo general, se agrega una solución de tinción de 1 ml a un pozo de la placa de seis pocillos, y un pozo de la placa de 96 pocillos agrega 100 μl de solución de tinción al medio; incubar en una incubadora de 37 ° C durante 10-20 min;

B. Después de eliminar la solución de trabajo Hoechst 33342, lavar 2-3 veces con PBS u otro tampón adecuado, cada vez durante 3-5 min;

C. Observe directamente debajo de un microscopio de fluorescencia, la longitud de onda de excitación es de 350 nm, y la longitud de onda de emisión es de 460 nm.

G1127-1ml

Precauciones

1. La concentración y el tiempo de incubación de la solución de trabajo de tinción Hoechst 33342 se pueden ajustar de acuerdo con la situación real.

2. Los tintes fluorescentes tienen problemas de apagado. Intenta completar la prueba el mismo día después de la teñida. Las tabletas de montaje de enfriamiento anticuorescente (G1401 recomendadas) se pueden usar para disminuir la velocidad de fluorescencia.

3. Por favor, use la capa de laboratorio y los guantes desechables durante la operación.

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