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Descripción del producto
El kit de quimioluminescence ECL es un kit de quimioluminiscencia altamente sensible basado en el principio de la quimioluminiscencia de Luminol ECL. Este producto puede reaccionar químicamente con la peroxidasa de rábano picante (HRP), junto con anticuerpos secundarios para producir fluorescencia, y la muestra puede detectarse mediante prensado de tabletas de rayos X u otro equipo de imágenes de fluorescencia apropiado (cámara CCD, etc.).
La compañía actualmente produce dos tipos de kits de quimioluminiscencia de ECL, que son el kit G2014 ECL Chemiluminescence y el kit de quimioluminiscencia de ECL ultraensible G2020. Para la detección de proteínas diana con alta abundancia, como la proteína de referencia interna, G2014, se recomienda, lo que puede detectar la proteína objetivo con el contenido mayor o igual a 2NG. Para la proteína diana con baja abundancia que es difícil de detectar, se recomienda G2020. La sensibilidad de este producto es al menos 5 veces más alta que la del G2014, y puede detectar la proteína de nivel PG con luminiscencia más estable.
Número de componentes | Componente | G2014-50ml |
G2014-1 | Ecl una solución | 50 ml |
G2014-2 | Solución ECL B | 50 ml |
1. Preparación del fluido de trabajo de ECL: mezcle el líquido líquido y el líquido de ECL B en igual volumen, y manténgalos a 4 ℃ alejados de la luz. Úsalo justo después de que esté listo, dentro de 2 días.
2. En el experimento de transferencia Western, la membrana PVDF se incubó por el anticuerpo secundario, se lavó durante varias veces, y el exceso de líquido fue absorbido por el papel de filtro. Se colocaron dos capas de guantes de PE u otras películas transparentes a la caja de exposición. La proteína de la membrana PVDF se colocó boca arriba entre las dos capas de la caja de exposición. Se añadió la solución de trabajo de ECL mixta para cubrir la película y se colocó en la película durante 1-2 min.
3. Use papel de filtro o papel absorbente para absorber el líquido de trabajo ECL, cubra la película superior y comience a presionar la película.
4. Se recomiendan los reactivos de desarrollo y fijación (G2019, G2023 y G2024) se utilizarán para desarrollar y solucionar la película prensada. Ajustó las condiciones de exposición de acuerdo con la intensidad luminosa.
1. Las puntas de la pipeta deben reemplazarse durante el proceso de transferencia de líquidos de ECL líquido A y líquido B. La contaminación cruzada del líquido A y el líquido B dará lugar a la falla gradual del líquido A o B. Además, la contaminación de los iones metálicos lo hará. Reducir la sensibilidad de este reactivo. Por favor, preste atención para usar consejos de pipetija limpia, selle bien después de su uso.
2. Si el fondo después de la exposición es muy profundo, la razón puede ser que la concentración del anticuerpo secundario es demasiado alto, o la concentración del anticuerpo primario es demasiado alto, o la solución de sellado no es adecuada, y otra solución de sellado debe ser usado.
3. Si la fluorescencia se detiene rápidamente, puede deberse a la fluorescencia excesiva de la banda objetivo, lo que resulta en el consumo rápido de ECL por HRP.
4. Si no hay una señal luminosa, puede ser que la expresión de proteínas diana sea muy débil, lo que puede prolongar el tiempo de presentación de la tableta.
5. Por favor, use una capa de laboratorio y guantes desechables durante la operación
