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Kit de detección MTT 200T Kit de detección MTT

Volumen: 200T

Estado de Disponibilidad:
  • G4101-200t
  • Servicebio

Descripción del producto

Información del Producto

nombre del producto

Gato. No.

Especificación

Kit de detección MTT

G4101-200t

200t

G4101-1000t

1000t

Introducción del producto:

Este kit de detección de productos MTT se usa ampliamente en la proliferación celular y la determinación de la actividad, así como la detección de fármaco a citotoxicidad. El nombre completo de MTT está 3- (4,5-dimetil-2-tiazolil) -2,5-difenil-2-h-tetrazolium bromuro, y el nombre chino es el azul de Tiazole. El principio de detección es que el succinato deshidrogenasa en las mitocondrias de las células vivas puede reducir el sustrato exógeno MTT a Formazano de color azul-púrpura azul insoluble en agua (Formazano) y depositar en las células, mientras que las células muertas no tienen tal función. Luego use dimetilsulfóxido (DMSO) para disolver los depósitos de formazos en las células y mida el valor de absorción de la luz a 490 nm o 570 nm con un lector de microplacas. Dentro de un cierto rango de números celulares, la cantidad de formación de formazos es el número de células vivas es directamente proporcional. De acuerdo con el valor de absorbancia medido (valor OD), se puede juzgar el número de células vivas. Cuanto mayor sea el valor de OD, más se mide el número de células vivas y más fuerte (si se mide la toxicidad del fármaco, significa que la toxicidad de las drogas es menor). Cuando se usa este kit para detectar la viabilidad celular, el sobrenadante debe ser aspirado después de la reacción, por lo que no se puede usar para la detección de células suspendidas. Si necesita detectar células suspendidas, se recomienda utilizar otros productos de nuestra empresa (Kit G4103 CCK-8).

Almacenamiento y transporte.

Transporte con hielo mojado; almacenar a 4 ° C en la oscuridad con un período de validez de 3 meses; o almacenar a -20 ° C en la oscuridad con un período de validez de 6 meses. Evite la congelación y descongelación repetida.

Componente

Número de componentes

Componente

G4101-200t

G4101-1000t

G4101-1

MTT trabajando fluido

10 ml

2 × 25 ml

G4101-2

DMSO

20 ml

4 × 25 ml

Manual del usuario del producto

1 PC

1 PC

Pasos de operación:

1. Tratamiento de células adherentes: después de que las células se adhieran a la pared, agregue medicamentos y transfección de acuerdo con el diseño experimental;

2. Prueba de viabilidad celular: agregue 20 μl de solución de trabajo MTT a cada pocillo e incubar durante 4 h en una incubadora de células;

3. Retire el sobrenadante: después de que se complete la incubación, aparecerá una pequeña cantidad de cristales púrpuras en la parte inferior de la placa de pozo, que se puede observar bajo un microscopio 40x. Use una pipeta para aspirar con cuidado la solución sobrenadante en el pozo (no chupe los cristales púrpuras en la parte inferior);

4. Desarrollo de color: agregue 100 μl de DMSO a la placa de pozo, incube a 37 ° C durante aproximadamente 15 minutos (puede tocar la parte inferior de la placa con su dedo y agitarlo ligeramente), y espere a que los cristales púrpuras se disuelvan. Si los cristales púrpuras son más pequeños y menos, el tiempo de disolución será más corto; Si los cristales púrpuras son más grandes y más, el tiempo de disolución puede extenderse adecuadamente;

5. Detección: mida la absorbancia a una longitud de onda de 490 nm o 570 nm. Si el filtro 570 NM no está disponible, se puede usar un filtro de 560-600 NM.

Notas:

1. El DMSO se solidificará a una temperatura más baja, y se puede reconstituir a 37 ° C sin afectar su uso.

2. El principio de detección de este kit se basa en la reacción catalizada por deshidrogenasa. Si hay más agentes reductores (como algunos antioxidantes) en la muestra que interferirán con la detección, intentará eliminarlos.

3. Para su seguridad y salud, use abrigos de laboratorio y guantes desechables para la operación.

¡El producto es solo para fines de investigación científica, no para el diagnóstico clínico!

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