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Kit de inmunohistoquímica Anti-conejo de anticuerpo secundario para IHC Western Blot

Estado de Disponibilidad:
  • G1215-200t

Descripción del producto

Introducción del producto:

Este kit es un kit de inmunohistoquímica de dos etapas de alta sensibilidad, adecuado para el desarrollo de color posterior de los anticuerpos primarios derivados de conejos. El kit contiene IgG anti-conejo conjugado con HRP de Peroxidasa HRP de PEROXIDASA HRP. Este producto es adecuado para anticuerpos primarios derivados de conejos. En los experimentos de IHC y Western Blot, los anticuerpos secundarios anti-conejo de cabra marcados con HRP son los mismos que los anticuerpos primarios derivados del conejo. El anticuerpo (reacciona con el antígeno primero) se une y luego reacciona con DAB. DAB es un sustrato de peroxidasa de rábano picante (HRP). Bajo la catálisis de HRP, DAB produce precipitados marrones para lograr la amplificación de la señal y el desarrollo del color.

Contenidos del paquete:

Número de artículo del producto

nombre del producto

Especificación

G1215-200t

Kit de inmunohistoquímica

200t

Condiciones de almacenamiento: Transporte de hielo húmedo; Almacene el anticuerpo secundario a -20 ° C, y la dilución de DAB y una solución de solución de stock DAB 50 × a 4 ° C; Válido por 12 meses.

Componente:

Número de componentes

Componente

G1215-200t

G1215-1

Diluyente diluyente

12.5 ml

G1215-2

50 × kit dab

250 μl

G1215-3

Anticuerpo secundario anti-conejo de cabra marcado con HRP

100 μl

Manual de uso

1

Paso

1. Traiga su propio PBS (recomendado G4202, G0002), reactivo de contaminación nuclear (solución de tinción de hematoxilina recomendada G1004, solución de diferenciación de hematoxilina G1039, solución azul que regresa de hematoxilina G1040), degradado de alcohol, xileno, tabletas de montaje, etc.

2. Prepare la solución de trabajo del anticuerpo secundario: diluya el anticuerpo secundario anti-conejo de cabra marcado con HRP con PBST (pH 7.2-7.4) en una proporción de 1: 200 para obtener la solución de trabajo del anticuerpo secundario. Preparado para uso inmediato, use dentro de las 48 horas.

Prepare la solución de trabajo de desarrollo de color DAB: agregue 20 μl de solución madre de 50 × DAB a cada 1 ml de diluyente DAB, mezcle bien para su uso posterior.

Instrucciones:

1. De acuerdo con los procedimientos inmunohistoquímicos de rutina, las secciones de tejido son predefinizadas, recuperación de antígenos, bloqueadas e incubadas con el anticuerpo primario, y luego se lavan tres veces con PBS durante 5 minutos cada uno.

2. Incubación de anticuerpos secundarios: agregue 50-100 μl de la solución de trabajo de anticuerpos secundaria a cada rebanada para cubrir completamente el tejido, y la incubación a temperatura ambiente durante 30-60 min. Lave tres veces con PBS durante 5 minutos cada vez.

3. Desarrollo de color DAB: agregue 50-100 μl de solución de trabajo DAB a cada rebanada, incube durante varios minutos a temperatura ambiente, observe bajo el microscopio para controlar el desarrollo del color al efecto esperado, y luego lavar inmediatamente con agua para detener el agua. Desarrollo de color.

4. (Opcional) Destenerse de los núcleos celulares: las secciones se manchan con una solución de tinción de hematoxilina durante 3-5 min, y luego se lava con agua del grifo; después de la rápida diferenciación con la solución de diferenciación de hematoxilina durante 3-5 s, se lava con agua del grifo; Lavado con agua del grifo o devuelto a azul con solución de hematoxilina 3-5 s.

5. Montaje: las rodajas están deshidratadas por el alcohol degradado de acuerdo con los pasos habituales, transparentes por xileno, y las diapositivas se montan con goma neutra.

Precauciones

1. Si el fondo es demasiado oscuro durante el desarrollo de color inmunohistoquímico, considere extender el tiempo de lavado, use una solución de bloqueo adecuada para bloquear, inactivar la catalasa endógena, acortar el tiempo de desarrollo de color y reducir la concentración del anticuerpo secundario. Si no hay desarrollo de color o el desarrollo de color es demasiado ligero, puede aumentar adecuadamente la concentración del anticuerpo primario y el anticuerpo secundario para extender el tiempo de desarrollo del color y luego verifique si el anticuerpo secundario se desarrolla normalmente.

2. DAB es perjudicial para el cuerpo humano, tenga cuidado al manejarlo, y cuídase para evitar el contacto directo con el cuerpo humano o la inhalación del cuerpo.

G1215-200tq

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