Solución de concentración de lentivirus 5 × Solución para biología celular Reactivos de enseñanza

G1801-100ml

Descripción:

La solución de precipitación de lentivirus es un reactivo de concentración lentiviral simple, rápido y eficiente que puede hacer un enriquecimiento simple y eficaz de todo tipo de partículas lentivirales. El reactivo es fácil de operar, y solo la solución madre de virus lenta y 5 × El concentrado de precipitación de virus sedimentario se mezcla, y durante un cierto período de tiempo, se puede centrifugar con una centrífuga de alta velocidad ordinaria, y las partículas virales lentas concentradas, la La tasa de recuperación es del 90% o más, aumente 100 veces el título viral.

Almacenamiento y transporte.

Bolso de hielo (hielo húmedo) Transporte; Conservación de 4 ° C, válida por 12 meses.

Pasos

1. Recoja el sobrenadante lentiviral y filtrarlo con un filtro estéril con una membrana de filtro de 0,45 μm (se recomienda la membrana de PES con la absorción de proteína baja) para eliminar las celdas y los residuos (antes de la solución madre de virus, la membrana del filtro se puede enfriar con 3-5 ml PBS una vez por adelantado);

2. Mezcle el sobrenadante de lentivirus y el concentrado de precipitación de lentivirus de 5 × en una proporción de 4: 1 (4 partes del sobrenadante del virus y 1 parte del concentrado de virus), e incube la mezcla a 4 ° C durante 2 h. Durante este período, se mezcle boca abajo 10 veces cada 30 minutos, o incube durante la noche a 4 ° C (extender adecuadamente el tiempo de incubación puede aumentar la tasa de recuperación de virus);

3. Después de incubar durante un cierto período de tiempo, centrifugue a 8000 g durante 10-15 minutos a 4 ° C;

4. Retire con cuidado el sobrenadante, resuspender las partículas lentivirales con el volumen original de 1/10 ~ 1/1 100 de DMEM o PBS (se recomienda G4202) (en algunos casos, el precipitado puede no ser visible a simple vista), suavemente Pipetee uniformemente, y resuspend después del precipitado, el título de la muestra de lentivirus concentrado se puede determinar y luego alícuotas de acuerdo con el uso experimental y se almacena a -80 ° C (minimiza el número de congelación y descongelación repetidas del lentivirus para evitar reducir la reducción del Titro del virus).

Precauciones

1. Este kit no proporciona filtros y jeringas, por favor traiga sus propios filtros y jeringas.

2. Aunque los componentes de este kit tienen un cierto efecto protector en la congelación repetida y la descongelación del lentivirus, intente evitar la congelación repetida y la descongelación del lentivirus.

3. Por favor, use capas de laboratorio y guantes durante la operación.