TELÉFONO

+86 (027) 5111 3188

categoria de producto

Compartir con:

Solución de lisis IP 100 ml de solución utilizada para los tejidos celulares de LYSE para preparar muestras de proteínas

Estado de Disponibilidad:
  • G2038-100ml

Descripción del producto

Introducción del producto

El lisado IP es un lisado que lisa celdas o tejidos para preparar muestras de proteínas en condiciones no desnaturalizadas. Las muestras de proteínas obtenidas por los tejidos de lisificación o las células con esta solución de lisis se pueden usar en la página, Western Blot, inmunoprecipitación (precipitación de inmunol, IP), co-inmunoprecipitación (CO-IP), chip (cromatina inmunopre-cipitación) y experimentos ELISA.

Los componentes principales de este producto son de 25 mm Tris-HCl, NaCl de 150 mm, EDTA 1 mM, 1% NP-40 y 5% Triton X-100. Se puede aplicar a las muestras de tejido animal o vegetal, así como muestras fúngicas o bacterianas.

Instrucciones

Traiga su propio inhibidor de la proteasa. Los inhibidores de la proteasa deben agregarse al lisado IP antes de su uso, y se recomiendan G2006, G2007, G2008, etc. para prevenir la degradación de las proteínas. La solución de lisis IP mencionada en los siguientes métodos de uso, todos significa que se han agregado los inhibidores de la proteasa.

Para muestras de tejidos:

1. Las piezas de tejido se lavan con PBS precalado (G4202 recomendadas) para eliminar las manchas de sangre, cortar en trozos pequeños y colocarse en un homogeneizador.

2. Agregue 10 veces el volumen de lisis del tejido tampón de lisis de baja temperatura homogeneización (recomienda el molinillo de tejido de alta velocidad KZ-III-F y KZ-III-FP desarrollado y producido de forma independiente por ServiceBIO de forma independiente. Tenga en cuenta que la cantidad de lisado IP utilizada se puede agregar en una proporción de aproximadamente 50 mg de tejido a 1 ml de lisado. Si el contenido de la proteína tisular es baja, la cantidad de lisado puede reducirse para aumentar la concentración de proteínas en la solución de extracto de crudo.

3. Transfiera el homogeneizado a un tubo de centrífuga de 1,5 ml y agite. En el baño de hielo durante 30 minutos, Pipette repetidamente cada 10 minutos para asegurarse de que las células de tejido estén completamente lisadas;

4. Centrifugue a 12000 g durante 5 min, y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.

Para muestras de células adherentes:

1. Lave las células 2-3 veces con PBS, y aspire a fondo el líquido restante por última vez.

2. De acuerdo con la proporción de 250 μl de lisado para celdas en cada pocillo de la placa de 6 pocillos, pipetee el lisado IP en la placa y la botella de cultivo celular, y agite la placa y la botella repetidamente para que el lisado se ponga completamente en contacto con las celdas para 3-5 min.

3. Raspe las celdas con un raspador de células y recogerlas en un tubo de centrífuga.

4. Centrifugue a 12000 g durante 5 min, y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.

Para muestras de celdas de suspensión:

1. Recoge las células por centrifugación.

2. Mezcle el líquido celular con el tampón de lisis IP en la proporción de 250 μl de tampón de lisis por pocillo de la placa de 6 pocillos, y agitar.

3. En un baño de hielo durante 30 minutos, Pipette varias veces cada 10 minutos durante el cual se aseguran de que las células estén completamente lisadas.

4. Centrifugue a 12000 g durante 5 min, y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.

Para muestras bacterianas o fúngicas:

1. Tomar 1 ml de suspensión bacteriana, centrifugar para eliminar el sobrenadante, lavar una vez con PBS para eliminar completamente el líquido. Vortex para dispersar las bacterias tanto como sea posible.

2. Agregue 100-200 μl de tampón de lisis IP y vórtice suavemente para mezclar bien las bacterias y el tampón de lisis a fondo.

3. En un baño de hielo durante 10 minutos, Pipette varias veces cada 2 minutos para garantizar la lisis completa de las bacterias.

4. Centrifugue a 12,000 g durante 5 min, y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.


Precauciones

1. Los tejidos o células pueden parecer pegajosos cuando se lisan. Puede pipetearse repetidamente o vordexado hasta que sea líquido. Si ha sido más grueso, puede agregar una cantidad adecuada de solución de lisis.

2. Este reactivo no contiene inhibidores de la proteasa, debe preparar sus propios inhibidores de la proteasa y agregarlos antes de usarlos. Se recomienda utilizar el G2006, G2007, G2008 de la compañía y otros inhibidores de la proteasa relacionados.

3. La solución total de proteínas obtenida por lisis de este producto es compatible con el kit de detección cuantitativa de proteínas BCA de nuestra compañía (G2026).

4. Por favor, use la capa de laboratorio y los guantes desechables durante la operación.


G2038-100ml

Contact us

enlaces rápidos

categoria de producto

Ponerse en contacto

 5º Piso, 22 Edificio, Biopark, Gaoxin 2ª Road No. 388, Zona de Desarrollo de Alta Tecnología del Lago East, Wuhan, Hubei, China 430079
 +86 (027) 5111 3188
Copyright © 2021 Wuhan ServiceBIO Technology Co., Ltd.