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Solución de tampón de lisis RIPA Reactivo de bioquímica débil

Estado de Disponibilidad:
  • G2033-100ml

Descripción del producto

Tampón de lisis ripa (débil)

Precio $ 18.3 / PC

Artículo No. G2033-100ml

Introducción del producto:

El tampón de lisis de Ripa (tampón de lisis de Ripa) es un tampón de lisis rápida de células y células tradicionales. La muestra de proteína después de la lisis con el tampón de lisis de Ripa se puede usar para el Western regular, IP, etc. Hay muchas fórmulas para tampón de lisis de Ripa, que se pueden dividir en fuerte, mediano y débil de acuerdo con el efecto. Este lisado es lisado de Ripa débil, y sus componentes principales son 50 mm Tris-HCl, NaCl de 150 mm, 1 mM EDTA-NA2, 1% NP-40, desoxicolato de sodio al 0,25%.
Contenidos del paquete:

Número de artículo del producto nombre del producto Especificación
G2033 Tampón de lisis ripa 30 ml / 100 ml


Condiciones de almacenamiento: Almacenar a 4ºC en la oscuridad, válida durante 12 meses.

Instrucciones:

Para muestras de tejido:

1. Las piezas de tejido se lavan con PBS fríos para eliminar las manchas de sangre. Cortar en trozos pequeños y colocar en un homogeneizador.

2. Agregue 10 veces el volumen del tejido a este reactivo (agregue inhibidor de la proteasa dentro de unos minutos antes del uso) y homogeneínese a fondo con una molinilla de tejido de alta velocidad.

3. Transfiera el homogeneizado a un tubo de centrífuga de 1,5 ml y agite. En el baño de hielo durante 30 minutos, Pipette repetidamente para asegurar la lisis celular completa.

  1. Centrifugue AT12000G durante 5 min, y recoge el sobrenadante, que es la solución total de proteínas.


Para muestras de células cultivadas:

1. Para celdas adherentes:

A. Lave las células 2-3 veces con PBS. Absorbe a fondo el líquido restante una última vez.

B. Agregue un volumen apropiado de este reactivo (agregue el inhibidor de la proteasa en unos pocos minutos antes del uso) en la placa de cultivo y la botella durante 3-5 min. Durante este período, la placa de cultivo y la botella se sacudieron repetidamente para que los reactivos se pongan en contacto con las células.

C. Raspe las células y reactivos con un raspador de células y recogerlos en un tubo de centrífuga de 1,5 ml.

2. Para celdas de suspensión:

Recoge las células por centrifugación, agregue aproximadamente 250 ul de este reactivo (agregue inhibidor de la proteasa dentro de unos minutos antes del uso) por celdas de placa de 6 pocillos, y agitar.

Baño de hielo durante 30 minutos, durante el cual el tiempo, pipeta con una pipeta de 200UL varias veces cada 10 minutos para asegurarse de que las células estén completamente lisadas.

  1. Centrifugue a 12000 g durante 5 min, y recoge el sobrenadante, que es la proteína total.


Precauciones:

Para muestras de tejido:
Aproximadamente 1 ml de este reactivo se agrega a LYSE cada 50 mg de tejido. Para los tejidos como el cartílago y la piel, la dosis de reactivos puede reducirse adecuadamente para aumentar la concentración de proteínas.

Para muestras de células cultivadas:

1. Bajo la densidad celular normal, agregue alrededor de 250UL de lisado a cada célula de placa de 6 pocillos.

  1. Puede aparecer más grueso durante el agrietamiento. Se puede pipetear repetidamente hasta que sea líquido. Si ha sido más grueso, puede usar un vórtice para agitar o agregar una cantidad adecuada de lisado.

  2. Este reactivo es perjudicial para el cuerpo humano, por favor, protéjalo adecuadamente.

G2033-100ml


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