Solución de tinción de trampa para el kit de tinción de osteoclastos

Principio

La trampa es una de las seis isozimas de fosfatasa ácida, el tipo VI. La trampa es rica en osteoclastos, generalmente como un indicador para identificar el osteoclasto. El osteoclasto manchado con el método de tinción de la trampa muestra un clarete positivo-rojo en citoplasma y negativo en el núcleo.

Contenido del paquete

Preserva

Válido en 12 meses cuando se almacena en4 ℃ y se mantiene en condiciones oscuras.

Los reactivos deben ser preReducido antes de usar

1. Mezcle una solución de partes iguales de nitrito de sodio y pararosanilina, marcada como solución B.

2. Disuelva el naftol de fosfato as-bi en 1 ml de N, N-Dimetil Formamida, marcado como solución C.

3. Preparación de la solución incubada: mezclar los reactivos que incluyen la solución de tampón de ácido acético (18 ml), la solución B (1 ml) y la solución C (1 ml), ajuste a pH = 5.0 por NaOH / HCL (1 m). Agregue esta solución de mezcla obtenida en el tubo que contiene tartrato de sodio potasio (0,282 g), agite bien y filtrado. Luego obtuvo la solución de incubación de trampas.

Proceduría

1, depadofiniza y rehidrata a agua destilada, lavar durante varios minutos.

2, la incubación de diapositivas dentro de la solución de incubación a 37 por 50-90 min.

3, Lave con agua corriente del grifo durante 2-5 min.

4, el núcleo de contrarrestain con solución de hematoxilina durante 1-2 min, diferenciar en ácido clorhídrico y de nuevo a azul en solución de amoníaco.

5, deshidrate con el método de rutina, luego claro y monte.

RESultos

El área de la actividad de la fosfatasa ácida positiva es Claret-Red y el núcleo es azul.

Notas

1, este kit de tinción se aplica en los tejidos óseos que ha sido descalcificado por EDTA. La solución de descalcificación de ácido tiene un efecto adverso en la actividad de la fosfatasa ácida de los tejidos óseos, por lo tanto, no es adecuado para esta solución de tinción.

2, las diapositivas deben lavarse con agua destilada antes de incubarse en una solución de tinción.

Ejemplos