Tampón de lisis de lisis de glóbulos rojos ACK LYSIS

Introducción del producto:

El tampón de lisis de glóbulos rojos, o tampón de lisis de ACK, es una solución de lisis clásica que se usa para eliminar los glóbulos rojos, que pueden eliminar completamente los glóbulos rojos sin dañar las células nucleadas. Las células de tejido obtenidas por lisis del lisado de glóbulos rojas no contienen glóbulos rojos, y se pueden usar más para su cultivo primario, fusión celular, análisis de citometría de flujo, separación y extracción de ácido nucleico y proteínas, etc.

El principio básico es lisar los glóbulos rojos utilizando el principio de la rotura de la membrana celular causada por la diferencia en la presión osmótica intracelular. Los ingredientes principales incluyen cloruro de amonio, bicarbonato de potasio y EDTA-NA2.

Debido a que los iones de amonio no pueden pasar a través de la membrana celular, pero otros iones pueden pasar, lo que resulta en una diferencia en la concentración de iones dentro y fuera de la célula, el agua externa se difunde en la célula, lo que hace que los glóbulos rojos se expanden y alcancen el efecto de lisis.

Lista de productos:

Condición y transporte de almacenamiento.

Almacenado a temperatura ambiente, válida por 12 meses.

Consejos de uso:

Muestra de celda de tejido:

1. Los tejidos frescos se digieren por tripsina o colagenasa para formar una suspensión de una sola célula, centrifugadora para descartar el sobrenadante;

2. Agregue lisado de glóbulos rojos a la pellet de la célula en una proporción de 1: 3-5, pipeta suavemente para mezclar, y LYSE durante 1-2 min;

3. Centrifugue a 800-1000 rpm durante 5-8 minutos, y deseche el líquido claro rojo claro por centrifugación;

4. Recoge la parte precipitada, agregue la solución de Hank o la solución de cultivo sin suero a centrifugar y lavarse 2-3 veces;

5. Si la lisis no está completa, repita los pasos 2 y 3;

6. Resuspender las células en una solución apropiada de acuerdo con las necesidades del experimento para experimentos posteriores; Como extraer ARN, es mejor usar una solución preparada con el agua DEPC al comienzo del paso 4.

Células de sangre:

1. sangre anticoagulante fresca, centrifugar y descartar el sobrenadante;

2. Agregue lisado de glóbulos rojos a la pellet de la célula en una proporción de 1: 6-10, pipeta suavemente para mezclar, y LYSE durante 1-5 min;

3. Centrifugue a 800-1000 rpm durante 5-8 minutos, y deseche el líquido claro rojo claro por centrifugación;

4. Recoge la parte precipitada, agregue la solución de Hank o la solución de cultivo sin suero a centrifugar y lavarse 2-3 veces;

5. Si la lisis no está completa, repita los pasos 2 y 3;

6. Resuspender las células con una solución apropiada de acuerdo con las necesidades experimentales para experimentos posteriores; Como extraer ARN, es mejor usar una solución preparada con el agua DEPC del Paso 4.

Precauciones

1. Este producto se filtra y se esteriliza. Preste atención a la operación aséptica cuando la use para evitar la contaminación bacteriana.

2. Si la prueba de seguimiento se usa para el cultivo celular, se debe realizar en una banca de trabajo ultra limpia durante la operación, y se debe prestar atención a una operación aséptica para evitar que las células se contaminen y afecten el cultivo celular.

3. Después de la centrifugación y el lavado, si se encuentran una cantidad muy pequeña de glóbulos rojos, la prueba se puede continuar sin afectar las pruebas posteriores.

4. Por favor, use la capa de laboratorio y los guantes desechables durante la operación.